BigDyeで反応させたシークエンスPCR溶液の簡単エタ沈（エタノール沈殿）
現在の研究室では、DNAの配列解析は、シークエンスPCR溶液を乾燥ペレットにして受託会社に送付しております。シークエンスPCRは溶液量を10uLにして行っています。以下のプロトコールは、PCR後の溶液に対して行います。
1. Add 40uL 80% Ethanol
2. Incubate room temperture (r.t) for 15min
3. Centrifuge 150,000rpm, 10min, r.t
4. Remove sup
5. Add 125uL 70% Ethanol
6. Centrifuge 150,000rpm, 10min, r.t
7. Remove sup & Dry up
8. Submit to Azenta
蛋白質精製の基本、SDS電気泳動
自作CBB染色液 (500mL)
CBB R-250: 1.25g
10% EtOH: 250mL
10% Acetic acid: 50mL
MilliQ: 200mL
＊メタノールではなく、エタノールで作るのがポイントです。廃液の処理が楽だからです。ゲルを染色した後の脱色は水道水を入れてレンジで温めるだけで色が抜けてくれるのですごく楽です。染色した後の染色液は、別ボトルに回収しておけば、何度も使用可能です。
ゲル作成装置（10枚用ミニゲル作成槽兼グラジェント作成槽、NA-1610、日本エイド⁻株式会社）
電気泳動のゲルが10枚まとめて作成可能なのでとても便利です。
私が普段使用している12% アクリルアミドゲル10枚用のレシピは下記の通りです。
まずSeparateゲル溶液を全量入れ、イソプロパノールの重層します。ゲルが固まったらイソプロパノールを除き、Upperゲル溶液を1枚のゲル辺り1.6mL程度入れ、コームを指します。
Separate Upper
30(w/v)%-アクリルアミド/ビス混合液(29:1) 39.6mL 2.65mL
（ナカライテスク株式会社、06141-35）
WIDE RANGEゲル調製用緩衝液(4倍濃縮) 24.75mL 5mL
（ナカライテスク株式会社、07831-94）
MilliQ水 33.66mL 12.15mL
10%(w/v) SDS 990uL 200uL
10%(w/v) APS 990uL 200uL
TEMED 66uL 20uL
普段は10枚ずつまとめて作成し、コームが刺さったままの状態でゲルの周りを濡れたキムワイプで覆い、ラップでくるんだ状態で冷蔵庫に保存しています。ゲルが乾燥しなければ１～２週間くらいは使用可能です。
